اپراتوری دستگاه HPLC
دوره اپراتوری HPLC کیمیا گوهر؛ پمپ گرادیان، ستون C18، آشکارساز UV-DAD، آمادهسازی فاز متحرک، عیبیابی فشار و اعتبارسنجی ICH Q2.
جزئیات و مشخصات اپراتوری دستگاه HPLC
دوره اپراتوری HPLC کیمیا گوهر؛ پمپ گرادیان، ستون C18، آشکارساز UV-DAD، آمادهسازی فاز متحرک، عیبیابی فشار و اعتبارسنجی ICH Q2.
اپراتوری کروماتوگرافی مایع کارایی بالا
HPLC پرکاربردترین دستگاه آزمایشگاه‌های دارویی، غذایی و محیط‌زیستی است. دوره کیمیا گوهر با معماری سیستم آغاز میشود: مخزن و آمادهسازی فاز متحرک شامل فیلتراسیون ۰/۲۲ میکرومتری و حباب‌گیری با سونیکاتور، پمپ‌های ایزوکراتیک و گرادیان، انژکتور ولیو با لوپ ۲۰ میکرولیتری، ستونهای C18 و شیمی فاز معکوس و آشکارسازهای UV-Vis، DAD، RI و فلوریمتری. سپس مفاهیم مناسب بودن سیستم شامل عامل دم و تکرارپذیری، و عیبیابی فشار بالا و پایین، پیک دم‌دار و شکسته آموزش داده میشود. مبانی اعتبارسنجی روش مطابق ICH Q2 نیز در پایان دوره مرور می‌گردد تا با الزامات آزمایشگاه‌های معتبر آشنا باشید.
فاز متحرک و پمپ
تهیه بافر، فیلتراسیون و حباب‌گیری؛ کار پمپ ایزوکراتیک و گرادیان و ترکیب درصدی حلال‌ها.
ستون و فاز معکوس
شیمی فاز ساکن C18 و C8، اثر درصد فاز آلی و pH و ستونهای با ذرات ریز برای تفکیک بالاتر.
آشکارسازها
انتخاب طول موج مناسب در UV و DAD و کاربرد آشکارسازهای RI و فلوریمتری برای تحلیل‌های خاص.
عیبیابی و اعتبارسنجی
ریشه‌یابی مشکلات فشار و شکل پیک و مرور پارامترهای اعتبارسنجی ICH Q2 برای روشهای معتبر.
سرفصل‌های کلیدی و پارامترهای عملی HPLC
| مبحث | جزئیات | مقدار نمونه | سطح |
|---|---|---|---|
| فاز متحرک | فیلتراسیون و حباب‌گیری | فیلتر ۰/۲۲ µm؛ سونیک ۱۰ دقیقه | پایه |
| تزریق | ولیو شش‌پورت با لوپ نمونه | ۲۰ µL | پایه |
| ستون C18 | ابعاد و اندازه ذرات فاز ساکن | ۱۵۰ × ۴/۶ mm؛ ۵ µm | پایه |
| آشکارساز UV/DAD | انتخاب طول موج و ثبت طیف | ۲۵۴ nm؛ بازه ۲۰۰ تا ۸۰۰ nm | پایه |
| مناسب بودن سیستم | عامل دم و تکرارپذیری تزریق | دم حداکثر ۲؛ RSD حداکثر ۲٪ | پیشرفته |
| عیبیابی فشار | فشار بالا و پایین سیستم | الگوی افت و نشتی | پیشرفته |
| اعتبارسنجی ICH Q2 | خطی بودن، دقت و صحت روش | R² ≥ ۰/۹۹۹ | پیشرفته |
سوالات متداول درباره دوره اپراتوری HPLC
دوره مقدماتی برای شروع کار مستقل شامل آمادهسازی، اجرای روش موجود و نگهداری روزانه است. دوره پیشرفته روی توسعه و اعتبارسنجی روش، تفسیر طیف DAD، ستونهای جدید و عیبیابی پیچیده تمرکز دارد و پیشنیاز آن گذراندن دوره مقدماتی یا سابقه کار است.
تمرینها روی سیستمهای HPLC با پمپ گرادیان، انژکتور ولیو، آشکارساز UV-Vis و DAD انجام میشود؛ تمرینهای گروهی شامل راهاندازی، تزریق، شستوشوی ستون و خاموشکردن استاندارد است.
در پایان دوره مقدماتی میتوانید روشهای موجود را اجرا و مشکلات رایج را مدیریت کنید؛ نوشتن روش جدید نیازمند دوره پیشرفته است که طراحی آزمایش، انتخاب ستون و اعتبارسنجی مطابق ICH Q2 را پوشش میدهد.
بله؛ دوره سازمانی با دستگاههای خود شما و روشهای در حال اجرای سازمان تنظیم میشود. این قالب برای آزمایشگاههایی که میخواهند چند اپراتور را با هزینه بهینه آموزش دهند، اقتصادیترین گزینه است.